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使用胎牛血清過程中常見問題解答

更新時間:2020-07-29  |  點擊率:925

培養(yǎng)珍貴的干細胞和較難養(yǎng)的細胞大部分實驗室均采用胎牛血清作為實驗耗材,它為細胞生長提供了必要的營養(yǎng)成分。但使用胎牛血清的過程也會常常出現(xiàn)問題,我們來細數(shù)下。

細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。

如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關:

(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;

(2)血清質(zhì)量不好,反復凍融的結果;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;

(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。