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揭示多能干細(xì)胞維持基因組穩(wěn)態(tài)新機(jī)制

更新時(shí)間:2021-11-10  |  點(diǎn)擊率:744

多能干細(xì)胞是個(gè)體發(fā)育的基礎(chǔ),也是再生醫(yī)學(xué)的重要種子細(xì)胞之一。由于發(fā)育地位特殊,多能干細(xì)胞基因組具高度穩(wěn)態(tài)(如小鼠胚胎干細(xì)胞的基因組變異率僅為胚胎成纖維細(xì)胞的1/100)。盡管多能干細(xì)胞較分化細(xì)胞具更強(qiáng)的基因組穩(wěn)態(tài)維持能力,大量擴(kuò)增培養(yǎng)、持續(xù)的DNA復(fù)制及特殊的細(xì)胞周期往往導(dǎo)致基因組變異,破壞其分化潛能,并產(chǎn)生致瘤風(fēng)險(xiǎn),成為多能干細(xì)胞走向臨床應(yīng)用的首要障礙。研究多能干細(xì)胞維持基因組穩(wěn)態(tài)的特殊機(jī)制,有助于解決應(yīng)用中大量擴(kuò)增培養(yǎng)產(chǎn)生的基因組變異難題,并能為體內(nèi)胚胎發(fā)育失敗或缺陷研究提供新思路。

中國(guó)科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所研究員鄭萍課題組長(zhǎng)期研究多能干細(xì)胞基因組穩(wěn)態(tài)特征和*調(diào)控機(jī)制。在前期工作中,鑒定了多能干細(xì)胞基因組穩(wěn)態(tài)特異關(guān)鍵調(diào)控蛋白因子Filia和Floped,并闡述了其作用機(jī)制及體內(nèi)重要生理功能(Cell Stem Cell 2015,16(6):684-698;Cell Research 2018,28(1):69-89;PLoS Biology 2019,17(10):e3000468;Science Advances 2020,6:eaba0682)。

長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long noncoding RNA, lncRNA)能通過(guò)相變,和蛋白因子形成condensates,有效增強(qiáng)蛋白因子濃度,從而顯著提高工作效率。研究人員推測(cè),多能干細(xì)胞很可能存在一些特異表達(dá)的lncRNAs,在其高效調(diào)控基因組穩(wěn)態(tài)中起重要作用。為此,該研究對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞進(jìn)行不同種類(lèi)的DNA損傷處理,結(jié)合RNA-seq分析,篩選到了10多個(gè)表達(dá)響應(yīng)損傷處理的干細(xì)胞特異lncRNA。針對(duì)其中1個(gè)尚未注釋、表達(dá)變化最為顯著且具物種保守性的lncRNA(命名為Discn,DNA damage-induced stem cell specific noncoding RNA)進(jìn)行了深入的功能和機(jī)制分析。發(fā)現(xiàn)Discn對(duì)維持多能干細(xì)胞基因組穩(wěn)定性至關(guān)重要,并揭示了其作用機(jī)制。Discn定位于核仁,和核仁蛋白NCL結(jié)合,阻止NCL在DNA損傷情況下遷移到核質(zhì)和RPA形成蛋白復(fù)合體,從而增強(qiáng)自由RPA含量。自由存在的RPA是DNA代謝(復(fù)制、修復(fù)和重組)的關(guān)鍵調(diào)控因子。因此,Discn-NCL-RPA軸能高效調(diào)控DNA復(fù)制和修復(fù)。Discn也廣泛表達(dá)于神經(jīng)干細(xì)胞、精原干細(xì)胞等成體干細(xì)胞中,提示其有重要生理功能。研究人員還構(gòu)建了Discn基因敲除小鼠,發(fā)現(xiàn)Discn基因敲除可導(dǎo)致新生致死及神經(jīng)發(fā)育異常,這些表型主要是由體內(nèi)DNA損傷產(chǎn)生的嚴(yán)重炎癥反應(yīng)引起。該研究揭示了多能干細(xì)胞中l(wèi)ncRNA介導(dǎo)的基因組穩(wěn)態(tài)調(diào)控新機(jī)制,研究結(jié)果以A novel lncRNA Discn fine-tunes replication protein A (RPA) availability to promote genomic stability為題,于近日發(fā)表在Nature Communications上。

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科研實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞的體外培養(yǎng)一直是一個(gè)重要環(huán)節(jié)。細(xì)胞要養(yǎng)好,就要用好血清,如Ausbian®特級(jí)胎牛血清,它適合各種細(xì)胞培養(yǎng),尤其適合難養(yǎng)細(xì)胞,如:干細(xì)胞、肝細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,原代培養(yǎng)、細(xì)胞融合、轉(zhuǎn)染細(xì)胞等。

Ausbian®特級(jí)胎牛血清所有血清出廠前,均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格質(zhì)控,每個(gè)批次附有詳細(xì)完整的《檢測(cè)報(bào)告》,包括:品名,貨號(hào),批號(hào),血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無(wú)菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長(zhǎng)能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。

實(shí)驗(yàn)人對(duì)于新批次血清,應(yīng)認(rèn)真審閱《檢測(cè)報(bào)告》,做好試用前篩選第一步。(如何看懂《檢測(cè)報(bào)告》,可登陸“締一生物"網(wǎng)站,留言技術(shù)部,得到免費(fèi)幫助。)

它在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)經(jīng)歷十幾年,被眾多科研工業(yè)客戶(hù)反復(fù)選擇,也是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的供應(yīng)品牌


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