淺談『胎牛血清』在細(xì)胞貼壁過程中的作用

更新時(shí)間：2023-03-04 | 點(diǎn)擊率：660

動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展，很大程度上推進(jìn)了現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)與醫(yī)藥相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。細(xì)胞培養(yǎng)該技術(shù)被廣泛應(yīng)用于單克隆抗體的制備、重組蛋白藥物的研發(fā)等行業(yè)，成為生物制藥領(lǐng)域的基礎(chǔ)且關(guān)鍵技術(shù)之一。

合格的胎牛血清，采自5-8月齡的牛胚胎。含有多種生長因子和細(xì)胞因子，可在一定程度上模擬細(xì)胞增殖和維持的過程。胎牛血清還含有大量的蛋白成分，其中主要的蛋白成分有白蛋白、A1抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、Ig類抗體，還有含量不等的脂蛋白、膽固醇、纖維結(jié)合蛋白、膽紅素和類胡蘿卜素等多種成分。

胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，可以終止胰蛋白酶消化、提供細(xì)胞生長所需的貼壁因子、免疫球蛋白、胰島素等其它營養(yǎng)成分及細(xì)胞因子。因此胎牛血清成為體外細(xì)胞培養(yǎng)體系中常用添加成分，為細(xì)胞生長和維持提供了必要的活性成分。

胎牛血清中胎球蛋白A(fetuin-A)等成分的差異在培養(yǎng)細(xì)胞粘附中已發(fā)揮重要作用。研究表明，細(xì)胞通過其粘附蛋白包括纖維連接蛋白（Fibronectin，F(xiàn)n）和體外連接蛋白（Vitronectin，Vn）吸附在人工材料的培養(yǎng)皿上。

研究表明，在含F(xiàn)BS培養(yǎng)基中培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC），含有較高的穩(wěn)定細(xì)胞粘附相關(guān)的β-肌動(dòng)蛋白和整合素β-1 （ITGβ1）的基因表達(dá)水平，并且隨著細(xì)胞密度的增加而增加。細(xì)胞微環(huán)境以多因子（趨化因子、細(xì)胞外基質(zhì)）協(xié)同的方式對細(xì)胞粘附與遷移進(jìn)行調(diào)控。

而胎牛血清以及高分子材料的細(xì)胞培養(yǎng)裝置，會(huì)對細(xì)胞的微環(huán)境產(chǎn)生一定的影響。當(dāng)細(xì)胞粘附在基底上時(shí)，細(xì)胞骨架會(huì)通過整合素（Integrin）與基底進(jìn)行連接，并通過粘著斑將肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白II產(chǎn)生的力學(xué)刺激傳遞給細(xì)胞外基質(zhì)。

胎牛血清在細(xì)胞粘附因子的成分上有所差異，可能由于不同細(xì)胞粘附因子的組成與細(xì)胞培養(yǎng)容器表面分子發(fā)生相互作用，導(dǎo)致細(xì)胞生長速度和活力的差異。

胎牛血清的選擇

結(jié)合前文所述，胎牛血清的品質(zhì)高低，直接關(guān)系到細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞貼壁等狀態(tài)的好壞。另外，有研究表明，高溫、反復(fù)凍融等狀況，都會(huì)使粘附因子有一定損失。

因此，選擇一款合格的胎牛血清，對于細(xì)胞培養(yǎng)而言至關(guān)重要。

胎牛血的采血時(shí)間要嚴(yán)格控制在5-8月齡，保證營養(yǎng)成分的豐富度。
胎牛血清出廠前需要經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測。
胎牛血清運(yùn)輸過程中，盡可能保證全程冷鏈運(yùn)輸。